一、
什么是生物安全柜?
生物安全柜(biological safety cabinets,BSCs)是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的,是能防止實驗操作處理過程中某些含有危險性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱型空氣凈化負(fù)壓安全裝置。
二、
為什么要使用生物安全柜?
當(dāng)操作液體或半流體,例如搖動、傾注、攪拌,或?qū)⒁后w滴加到固體表面上或另一種液體中時,均有可能產(chǎn)生氣溶膠。在對瓊脂板劃線接種、用吸管接種細(xì)胞培養(yǎng)瓶、采用多道移液器(加樣器)將感染性試劑的混懸液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中、對感染性物質(zhì)進(jìn)行勻漿及渦旋振蕩、對感染性液體進(jìn)行離心以及進(jìn)行動物操作時,這些實驗室操作都可能產(chǎn)生感染性氣溶膠。
由于肉眼無法看到直徑小于5μm的氣溶膠以及直徑為5-100μm的微小液滴,因此實驗室工作人員通常意識不到有這樣大小的顆粒在生成,并可能吸入或交叉污染工作臺面的其他材料。
綜上所述,正確使用生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養(yǎng)物交叉污染。生物安全柜同時也能保護實驗環(huán)境。
三、
生物安全柜如何保護使用者和實驗環(huán)境?
多年以來,生物安全柜的基本設(shè)計已經(jīng)歷了多次改進(jìn)。主要的變化是在排風(fēng)系統(tǒng)增加了HEPA過濾器。
對于直徑0.3μm的顆粒,HEPA過濾器可以截留99.97%,而對于更大或更小的顆粒則可以截留99.99%。HEPA過濾器的這種特性使得它能夠有效地截留所有已知傳染因子,并確保從安全柜中排出的是完全
不含微生物的空氣。
生物安全柜設(shè)計中的第二個改進(jìn)是將經(jīng)HEPA過濾的空氣輸送到工作臺面上,從而保護工作臺面上的物品不受污染。這一特點通常被稱為實驗對象保護(product protection)。這些基本設(shè)計上的變化使得三種級別的生物安全柜都得到了改進(jìn)。
注意事項
水平和垂直方向流出氣流的工作柜(“超凈工作臺”)不屬于生物安全柜,它只能提供一個潔凈的局部操作環(huán)境,做到產(chǎn)品樣品保護,卻不能保護實驗人員和環(huán)境,故不能應(yīng)用于生物安全操作。
四、
生物安全柜的分類與選擇
生物安全柜的分類
按照美國NSF49標(biāo)準(zhǔn),生物安全等級1級(P1)的媒質(zhì)是指普通無害細(xì)菌、病毒等微生物;
生物安全等級2級(P2)的媒質(zhì)是指一般性可致病細(xì)菌、病毒等微生物;
生物安全等級3級(P3)的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微生物,但感染后可治愈;
生物安全等級4級(P4)的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微生物,感染后不易治愈。
根據(jù)結(jié)構(gòu)設(shè)計、排風(fēng)比例和保護對象和程度不同,生物安全柜分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級,可適用于不同生物安全等級媒質(zhì)的操作。其中Ⅱ級生物安全柜還分為A1、A2、B1和B2四種類型。
生物安全柜的選擇
根據(jù)我國SN/T3901-2014《生物安全柜使用和管理規(guī)范》,使用者應(yīng)根據(jù)實驗保護對象、操作危險度微生物級別、在放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)品中的暴露程度,來選擇生物安全柜的類型。
在應(yīng)用細(xì)胞和組織培養(yǎng)物來進(jìn)行病毒繁殖或其他培養(yǎng)時,未經(jīng)滅菌的房間空氣通過工作臺面是不符合要求的。Ⅱ級生物安全柜在設(shè)計上不但能提供個體防護,而且能保護工作臺面的物品不受房間空氣的污染。
?、蚣?a target="_blank">生物安全柜還可用于操作危險度2級和3級的感染性物質(zhì)。在使用正壓防護服的條件下,Ⅱ級生物安全柜也可用于操作危險度4級的感染性物質(zhì)。
參考《人類和動物醫(yī)學(xué)診斷實驗室安全工作實踐指南》(2012年版),同時出于易使用性和強化安全性能的綜合考慮,Ⅱ級A2型生物安全柜是全國乃至全世界最常用的生物安全柜類型,它能夠滿足實驗室、醫(yī)院的一般用途,另外,從節(jié)能角度也較為經(jīng)濟。
而在操作少量揮發(fā)性化學(xué)試劑或放射性核素時,可選擇Ⅱ級B2型生物安全柜;操作大量揮發(fā)性化學(xué)試劑或放射性核素時,必須使用Ⅱ級B2型生物安全柜。
除了類型的選擇,安全柜的選型還需要從安全柜的性能考慮,如高效過濾器、風(fēng)路設(shè)計、報警裝置、負(fù)壓保護等指標(biāo)來進(jìn)行比較。
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